Буратино (1964)
зайчик Тёпа (1964)
собачка Чижик, Алеша-Почемучка, Кот (1965)
Шишига, Энек-Бенек (1966)
Шустрик, Мямлик
Филя (с 20 мая 1968 года)
Степашка (с 1970 года)
Хрюша (с 10 февраля 1971 года)
Каркуша (с 1982 года)
Цап-Царапыч (эпизодически до 1992 года)
Мишутка (первый, эпизодически до 1992 года)
Мишутка (второй, с 4 марта 2002 года)
Гном Буквоежка (эпизодически, с 2000 года)
Кот Василь Василич (эпизодически, с 1995 года)
Киндерино (Киндер-Сюрприз) (эпизодически, в середине-конце 90-х)
Попугай Кеша (эпизодически, в выпусках с Эдуардом Успенским, в середине-конце 90-х)
Домовой, Мокрёна (внучка Домового) , Лесовичок, Ёжик Федя, Петух Горошек (эпизодически, конец 1990-х)
С конца 1960-х годов героями передачи стали игрушечные звери с именами: Хрюша (поросёнок) , Степашка (заяц) , Филя (пёс) , Каркуша (ворона) , эпизодически появлялся кот по имени Цап-Царапыч и медведь Мишутка. Их озвучивают актёры московских театров: Филя — Григорий Толчинский, Игорь Голуненко, Сергей Григорьев (с 1994 года) ; Степашка — Наталья Голубенцева; Хрюша — Наталья Державина, Оксана Чабанюк (с 2002 года) ; Каркуша — Гера Суфимова, Галина Бурмистрова (с 1998 года), Мишутка - Георгий Подопригоров (с 2002 года) .
В 2000-х появляются новые персонажи : новый Мишутка (медведь) , Гном Буквоежка (гном-старичок) и другие. В создании образа нового Мишутки принимали участие дети из самых разных регионов России.
В феврале 2009 года в передаче появился персонаж по имени Бибигон.
После выступления с участием героев передачи следует мультфильм. Сами же куклы героев обновляются раз в три года.
Ведущими в разное время были Владимир Ухин (дядя Володя) , Валентина Леонтьева (тётя Валя) , Светлана Жильцова, Татьяна Веденеева (тётя Таня) , Ангелина Вовк (тётя Лина) , Татьяна Судец (тётя Таня) , Юрий Григорьев (дядя Юра) , Юрий Николаев (дядя Юра) , Юлия Пустовойтова, Дмитрий Хаустов. Также передачу вёл фокусник Амаяк Акопян в роли волшебника Рахата Лукумыча (в одной серии играл также злобного волшебника Джафара) . В настоящее время ведущими являются актриса Анна Михалкова, Оксана Фёдорова, актёр Виктор Бычков.